今日新闻         日期：2022/10/19

根据固定相微粒的大小把色谱柱的填装分为干法和湿法。微粒大于20μm的用干法，直径小于10μm的只能用湿法。湿法是目前装柱的主要方法，在此作主要介绍。

湿法装柱又叫匀浆装柱，当填料直径小于20μm时，因有很高的表面能易结团，同时化学键合相和高分子微球常带静电，所以必须选一溶质作为分散悬浮介质，经超声波处理使微粒在介质中高度分散，这种合适的溶剂叫匀浆剂，它有合适的黏度和密度，使粒子在其中不易沉降，可消除填料的结团效应。匀浆剂应当不与填料发生不可逆化学吸附或反应，便于顶替和洗剂。

按匀浆剂的性质，湿法装柱有3种。

1、平衡密度法  调节匀浆剂的密度使其与填料的密度一致，使填料粒子悬浮于溶剂中，这种溶剂常用密度较大的卤代烃，如四氯化碳与四溴乙烷的混合物。

2、非平衡密度法  当填料粒子为5μm或10μm，其粒子沉降不是关键问题，所要解决的问题是分散均匀度，一般选用四氯化碳、二氧六环、异丙醇、氯仿等不同比例的密度较小的溶剂。

3、黏滞法  使用黏度大的溶剂如环乙醇、乙二醇以阻滞粒子沉降。

装填前空柱必须清洗干净、晾干，接上柱子。按柱内体积称取一定量的填料，置于匀浆剂中（填料和匀浆剂的比例一般为1:8-10），混合，在超声波下处理几分钟，倒入匀浆罐中，密封，在高压下将溶剂（甲醇或乙烷）迅速压入柱内，当匀浆剂通过色谱柱时，压力Z大，随着匀浆剂逐渐被加压溶剂顶替，压力下降，20-30min后，慢慢减压，卸下柱子，装好接头，上机测试。