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今日新闻 日期:2023.9.22毛细管电泳进样的若干注意事项不管哪种进样方式,都有一些带共性的技术问题需要注意,具体说来,至少有下述几点。1、毛细管一经插入样品溶液,就宜立即开始进样操作,并在操作完成后迅速将其从样品槽移至运行缓冲液中,随即开始运行,否则将会产生毛细作用即虹吸现象,引起误差并使谱带展宽。2、如果电极和毛细管接触,毛细作用可能使某些样品流进间隔,使定量精度降低,区带展宽,甚至使峰分裂。另外,样品贮器和缓冲液贮器液面的高度不平衡所产生的虹吸现象会造成进样精度下降。3、只要检测器能提供足够大的信号,进样区带宜越小越好,加大进样区带会使柱效和分离度降低。从这个意义上讲,进样时间以短为宜,但是,时间太短常会使精度变差,特别是在柱子较短或较粗,样品浓度较高时,更是如此。4、温度也是使进样体积保持恒定的重要条件,因为温度直接影响到黏度。当然,这种影响不及对迁移时间影响严重,因为样品区带只占整个体积非常小的一部分。5、样品溶液和运行缓冲液不尽相同,样品溶液中的溶剂必须与运行缓冲液互熔,且不会引起后者沉淀。另外,前者的离子强度低于后者的离子强度。6/关于溶液和缓冲液的蒸发和损耗,样品溶液缓冲液都有一个蒸发问题。毛细管和电极的直径都比较小,需要用合适的封闭装置,以防止蒸发。
今日新闻 日期:2023.9.22
毛细管电泳进样的若干注意事项
不管哪种进样方式,都有一些带共性的技术问题需要注意,具体说来,至少有下述几点。
1、毛细管一经插入样品溶液,就宜立即开始进样操作,并在操作完成后迅速将其从样品槽移至运行缓冲液中,随即开始运行,否则将会产生毛细作用即虹吸现象,引起误差并使谱带展宽。
2、如果电极和毛细管接触,毛细作用可能使某些样品流进间隔,使定量精度降低,区带展宽,甚至使峰分裂。另外,样品贮器和缓冲液贮器液面的高度不平衡所产生的虹吸现象会造成进样精度下降。
3、只要检测器能提供足够大的信号,进样区带宜越小越好,加大进样区带会使柱效和分离度降低。从这个意义上讲,进样时间以短为宜,但是,时间太短常会使精度变差,特别是在柱子较短或较粗,样品浓度较高时,更是如此。
4、温度也是使进样体积保持恒定的重要条件,因为温度直接影响到黏度。当然,这种影响不及对迁移时间影响严重,因为样品区带只占整个体积非常小的一部分。
5、样品溶液和运行缓冲液不尽相同,样品溶液中的溶剂必须与运行缓冲液互熔,且不会引起后者沉淀。另外,前者的离子强度低于后者的离子强度。
6/关于溶液和缓冲液的蒸发和损耗,样品溶液缓冲液都有一个蒸发问题。毛细管和电极的直径都比较小,需要用合适的封闭装置,以防止蒸发。
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