今日新闻 日期:2026.1.15
柱温是色谱分析中的关键参数之一,其选择直接影响分离效果、分析速度、柱效及柱寿命。以下是选择柱温时需要注意的主要方面:
一、柱温对分离的影响
1、保留时间
柱温升高,化合物在固定相中的溶解度降低,保留时间缩短,分析速度加快。
柱温降低,保留时间延长,可能改善分离度。
2、分离度
过高的温度可能导致峰重叠(分离度下降);过低的温度可能使峰过宽,灵敏度降低。
需通过优化平衡分离速度与分离度。
3、适当升温可改善峰形,但过高可能引起热降解或固定相不稳定。
二、选择柱温的通用原则
1、参考固定相耐受温度
避免超过色谱柱说明书推荐的使用温度,以防固定相流失或损坏。
常见色谱柱耐温范围:硅胶基质:通常≤60℃(正相)或≤90℃(反相)。
2、考虑样品性质
高沸点样品:需较高柱温以保证在合理时间内流出。
热不稳定样品(如生物分子):需较低柱温防止分解。
手性分离:常对温度敏感,需精细优化(可能需低温以增强立体选择性)。
3、与检测器匹配
质谱(MS)检测:避免使用难挥发性流动相,同时柱温需确保化合物充分气化。
蒸发光散射电雾式检测:柱温影响溶剂蒸发,需优化信号稳定性。
三、不同色谱模式的柱温选择
1、气相色谱
恒温模式:适合沸点范围窄的样品。
程序升温:用于宽沸点范围样品,兼顾低沸点与高沸点组分分离。
2、液相色谱:反相色谱:可降低背压、提高效率,但可能加速柱降解。
正相色谱:通常室温或更低,温度敏感性强。
离子色谱:需控制温度以保持电导率稳定。
3、超临界流体色谱
柱温影响流体密度与溶解度,常与背压协同优化。